大鼠PKA-Cα(PKA-Cα)ELISA試劑盒|

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大鼠PKA-Cα(PKA-Cα)ELISA試劑盒: 產品貨號：tw046091; 用戶評價：; 快速詢價 QQ索要說明書免費咨詢電話：021-54728056
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大鼠PKA-Cα(PKA-Cα)ELISA試劑盒試驗原理：
大鼠PKA-Cα(PKA-Cα)ELISA試劑盒是固相夾心法酶聯免疫吸附實驗（ELISA）.已知待測物質濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進行檢測。先將待測物質和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后，加入親和素標記過的HRP。再經過溫育和洗滌，去除未結合的酶結合物，然后加入底物A、B，和酶結合物同時作用。產生顏色。顏色的深淺和樣品中待測物質的濃度呈比例關系。

大鼠PKA-Cα(PKA-Cα)ELISA試劑盒試劑盒內容及其配制

大鼠PKA-Cα(PKA-Cα)ELISA試劑盒自備材料
1）蒸餾水。
2）加樣器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。
3）振蕩器及磁力攪拌器等。

大鼠PKA-Cα(PKA-Cα)ELISA試劑盒安全性
1）避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體，請盡快用水沖洗。
2）實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
3）不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

大鼠PKA-Cα(PKA-Cα)ELISA試劑盒操作注意事項
1）試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。
2）實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質。
3）不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
4）使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。
5）使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
6）洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
7）底物A應揮發，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
8）加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
9）按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。

大鼠PKA-Cα(PKA-Cα)ELISA試劑盒樣品收集、處理及保存方法
1）血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2）血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3）細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4）組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘，取上清液
5）保存------如果樣品不立即使用，應將其分成小部分-70 ℃保存，避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

大鼠PKA-Cα(PKA-Cα)ELISA試劑盒試劑的準備
1）標準品：標準品的系列稀釋應在實驗時準備，不能儲存。稀釋前將標準品振蕩混勻。
2）洗滌緩沖液（50×）的稀釋：蒸餾水50倍稀釋。

大鼠PKA-Cα(PKA-Cα)ELISA試劑盒操作步驟
1）使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產生大量的泡沫，以免加樣時加入大量的氣泡，產生加樣上的誤差。
2）根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據自己的數量來定，能使用復孔的盡量做復孔。標本用標本稀釋液1：1稀釋后加入50ul于反應孔內。
3）加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時。
4）甩去孔內液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數增加一次。
5）每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。
6）甩去孔內液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數增加一次。
7）每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育10分鐘。避免光照。
8）取出酶標板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應立即測定結果。
9）在450nm波長處測定各孔的OD值。

大鼠PKA-Cα(PKA-Cα)ELISA試劑盒局限
6號標準品以上的結果為非線性的，根據此標準曲線無法得到精確的結果。

大鼠PKA-Cα(PKA-Cα)ELISA試劑盒試劑盒性能
1. 靈敏度：最小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關系數R值為0.990。
2. 特異性：不與其它細胞因子反應。
3. 重復性：板內、板間變異系數均小于10%。

大鼠PKA-Cα(PKA-Cα)ELISA試劑盒結果判斷與分析
1、儀器值：于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值
2、以吸光度OD值為縱坐標（Y），相應的待測物質標準品濃度為橫坐標（X），做得相應的曲線，樣品的待測物質含量可根據其OD值由標準曲線換算出相應的濃度。

用戶評論 (共6條評論): 辦事效率蠻高，幾天，就幫我搞定了這個試劑盒，謝謝！; 盒子蠻不錯，包含所需試劑，并提供了中英文雙版說明書及增值稅發票，很正規，銷售人員的態度也謙和。; 靈敏度不錯，重復性也行，試劑盒在我做的這些實驗中，與國內同行的盒子相比來說，性價比挺高的，尤其是價格占有不錯的優勢，贊一個！; 操作挺方便的，也簡單，當然，這也多虧了公司的技術人員詳細的實驗指導，很好，謝謝，實驗也相當成功。; 實驗出來的標準曲線很不錯（很優美），而且價格相對合理，技術指導很到位......; 我購買了兩盒，批次最新，保質期內，實驗結果做出來了，貨到的挺快，那么遠，幾天就到了，加上我做實驗，一共五天就搞定了。; 經朋友介紹，購買了此公司的ELISA試劑盒，用過，還不錯，實驗效果很好，基本達到實驗參數要求，如果，下次還做實驗的話，我還買這家的，朋友這幾年都在用這家的（長期訂貨）。

酶聯生物經過不斷的實驗優化和改進，積累了大量的經驗，擁有專業的酶聯研發團隊。利用專業的酶聯免疫技術自主研發的elisa試劑盒，能對血清及其它樣本定量檢測抗原，定性檢測特異性抗體。優質的試劑，先進的儀器和正確的操作是保證ELISA檢測結果準確可靠的必要條件。ELISA檢測的方便性、穩定性、重復性和可靠性方面都具有很大的優勢。

ELISA檢測技術服務內容：
1、雙抗體夾心法檢測抗原 2、間接法檢測抗體 3、為客戶提供各種ELISA技術進行樣本檢測。

以上代測費，凡購買本公司試劑盒，我們免費代測！
凡購買本公司目錄任何一種酶聯免疫檢測試劑盒，您只需將需要檢測的動物（Human, Rat, Mouse, Rabbit, Monkey, Pig……）種類和檢測指標（白介素類、激素類）及標本數量（48T/96T）通知公司業務員即可。在接到客戶標本當日起，現貨產品一周內將檢測報告交到客戶手中！
歡迎各科研單位在各種項目上與我們公司開展不同層次的密切合作，以雙贏求發展，共同進步，為中國檢測事業的發展積累經驗。

二、樣本要求
在收集標本前都必須有一個完整的計劃，必須清楚要檢測的成份是否足夠穩定。我們提倡新鮮標本盡早檢測，對收集后當天就進行檢測的標本，及時儲存在4℃備用，如有特殊原因需要周期收集標本，請造模取材后，將標本及時分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存。因冰室與室溫存在一定溫差，蛋白極易降解，直接影響實驗質量，所以避免反復凍融。代測放免標本的客戶取材前須向我司銷售人員索要說明書，具體操作注意事項請與我司技術人員溝通。

液體類標本：標本必須為液體，不含沉淀。包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上清、組織勻漿等。

血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。收集上清。如有沉淀形成，應再次離心。

血漿：應根據試劑盒的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，加入10%（v/v）抗凝劑(0.1M檸檬酸鈉或1%heparin 或2.0%EDTA.Na2)混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。如有沉淀形成，應再次離心。

尿液、胸腹水、腦脊液：用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。如有沉淀形成，應再次離心。

細胞培養上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時，用PBS（PH7.0-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融，以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。

組織標本：切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，緩沖液中可加入1μg/L蛋白酶抑制劑或50U/ml的Aprotinin（抑肽酶）。用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清置于-20度或-70度保存，如有必要，可以將樣品濃縮干燥。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。

三、寄標本時需注明以下情況：
1、標本編號；2、所測項目；3、是否做復孔；3、聯系方式；4、實驗后標本是否寄回。

客戶須知：
客戶應對所提供的材料及信息負責，如因客戶提供的材料及信息不準確而引起的實驗延誤或經濟損失由客戶承擔。

1.什么類型的可重復的結果都與實驗得到的？
每個套件還包含獲得的典型數據的圖表的手冊。在操作者，移液和洗滌技術，孵化時間或溫度，及配套年齡的任何變化會導致不同的結果。每個用戶都應該獲得自己的標準曲線。
2.我一定要在同一時間運行所有的樣本？
不，每個試劑盒采用stripwell微孔板。這使用戶可以在不同時間分析的樣品的不同的號碼。
3.我是否需要運行所有我的標準和樣品一式兩份？
是的，重復進行以監測測定精度，并提高所得到的測定結果的可信度運行。
4.是否可以存儲其他試劑比表示？
為了保證測試的適當性能，不推薦高于表示其它條件下的試劑盒組分的存儲。
5.我可以使用未在試劑盒中附帶推薦樣品類型？
該套件已經被證實在試劑盒中附帶列出的樣品類型。比其他驗證樣品類型尚未經過測試。聯系技術服務進一步的信息。
6.我可以修改協議？ BG ELISA試劑盒進行了優化，以提供最佳的結果。
修改的格式或協議可以得到不準確的和錯誤的結果。
7.我應該如何儲存我的樣品？樣品應儲存在-20℃或更低的溫度。
對于長期儲存，建議在-70℃-80℃凍結它們。
8.我的樣品產生的是該測定的動態范圍之外的值。我可以使用這些值？
因此建議使用落入標準曲線的范圍內，只有樣本值。標準曲線的范圍之外的值通常是非線性的，這會導致不正確地外推值。產生值比最高標準高出樣品應（進一步）稀釋和試驗重復進行。如果樣本低于測定的范圍內時，樣品被認為是不可檢測的。
9.我是否為空白或零標準的每一次??運行？
是的，這些都需要計算，并反映任何一天微妙而顯著性能變化白天和檢測，以檢測。排除特定的分析問題的根源時，他們也非常有幫助。
10.我可以改變樣品的體積我在試驗用？
我們不建議您更改卷的，因為所有的BG套件在給定的體積設計以獲得最佳性能
11.可以從不同的套件組件使用？
每個試劑盒含有具有特定批號，以確保所有的部件被最佳單獨執行，以及與所有在試劑盒中的其他成分的組成。 QC測試對這些特定批次進行。這是從來沒有建議使用自己的組件或組件來自其他包或供應商。
12.我的標準曲線看起來很好，但我沒有我的樣本中得到的信號時，我希望，為什么？
樣品可能不包含的分析物。矩陣效果可能會遮蔽檢測。確保如試劑盒插入物所述的推薦稀釋之后。如果被推薦的稀釋，檢查以確保稀釋正確執行。過度稀釋可能會造成樣品低于標準曲線的范圍內。
13.為什么我必須使用450-570nm波長之間的修正？
對于ELISA測定，讀取在雙重波長做是為了校正光密度貢獻的塑料孔中，燈和光的波動。
14.我是否需要使用平板振蕩器？
可靠的結果可以在沒有板振蕩器來獲得，但外徑的通常會比用板振蕩器獲得的那些低。
15.你怎么建議我洗我的盤子？
如果您正在使用自動洗板機，我們建議標定定期檢查，系統刷新與板洗滌緩沖液清洗前。同樣為手動墊圈真。中繼器或洗滌瓶也可以使用。用戶應該小心，以確保所有的內容都吸板拍干的無絨紙。
16.如果我提取我的樣本，我還需要遵循該工具包中插入給出的推薦的稀釋？
萃取程序之后所需要的樣品稀釋的量將通過純化和濃度的所使用的協議的影響而受到影響。稀釋或濃縮的量將必須由最終用戶來確定。
17.什么是高背景的原因是什么？
1）不適當的洗滌：檢查洗滌液儲量，并確保執行所有推薦的清洗步驟。
2）受污染的基材：確保沒有與金屬離子或試劑氧化基材的污染，使用前。在ELISA基板的開發時間分別保持額外的底物溶液。
3）底物暴露于光：暴露在光可能會導致襯底的藍色。保持，直到準備在黑暗（小瓶）的解決方案來分配到板中。
4）錯誤的孵育時間/溫度：一般遵循關于孵育時間和溫度的測試協議。然而，如果所有的孔中都強烈，同樣用在標準稀釋系列沒有觀察到強度梯度著色，那么它可能有必要觀察作為色的底物反應發展，為了使反應停止越快。
18.我的光密度均較手冊中，與我的套件附帶一點點更高（或更低）。為什么？
光密度是由許多的物理條件，如時間和溫度的影響。我們建議您縮短或延長與底物液的最終孵化補償。
19.什么是我應該找分析物的濃度預期？
一個給定的分析物的量可以變化，不僅從物種到物種，而且組織和細胞源之間。這種信息的最佳來源是目前的文獻，很容易通過互聯網在多個科學數據庫訪問。